山东大学生命科学学院导师：孔健 正文

　　孔健 教授
　　博士生导师
　　电话：0531－88364384转8401
　　E-mail:kongjian@sdu.edu.cn
　　
　　教育背景
　　孔健，女，1964年7月生，博士，教授，2003年被评为博士生导师。兼任山东省食品工业协会理事。
　　主要从事乳酸菌及其分子生物学研究。近五年承担国家自然基金2项，国家863课题2项、省部级重大科研课题6项。公开发表学术论文50余篇；主编了《农业微生物技术》，参编了《益生乳酸细菌》、《微生物学》、《微生物分子育种原理和技术》。曾获山东省第四届青年科技奖和山东大学“开拓未来”奖，获省部级科技进步奖一等奖1项、二等奖2项。承担微生物学专业方向的教学任务，主讲了“微生物学”、“微生物生理学”、“基因工程原理”、“微生物代谢调控”及“分子生物学实验技术”等多门本科生和研究生主干课程。
　　
　　学习经历
　　1982年9月~1986年7月，山东大学微生物学专业，获理学学士；
　　1988年9月~1992年6月，山东大学微生物学专业，获理学硕士；
　　1997年9月~2001年6月，山东大学微生物学专业，获理学博士；
　　1999年4月~2000年7月，赴丹麦皇家畜牧和农业大学乳制品和食品科学系访问学者，主要从事乳酸菌的分子生物学研究。
　　
　　工作经历
　　1986年7月~1992年8月，山东大学微生物学系，助教；
　　1992年9月~1997年8月，山东大学生命科学学院，讲师；
　　1997年9月~2002年8月，山东大学生命科学学院，微生物技术国家重点实验室，副教授；
　　2002年9月~今，山东大学生命科学学院，微生物技术国家重点实验室，教授。
　　2009年拟招收博士研究生1－2名，博士生毕业后能够胜任高校教师、科研单位研究人员以及食品发酵行业的高级研发技术人才等工作。
　　
　　研究方向
　　研究领域：食品微生物
　　主要研究方向：乳酸菌及其应用的关键技术研究
　　乳酸菌是一类重要工业微生物，在食品发酵、生物制药、畜牧养殖等方面广泛应用，是公认的安全（generally recognized as safe, GRAS）菌株。传统的优良发酵菌株均来源于自然筛选和诱变选育，自80年代初建立乳酸菌分子生物学后，分子定向育种成为直接获取优良菌株的有效手段。乳酸菌的应用领域又传统发酵迅速拓展到其它领域。本课题组就开辟乳酸菌新应用领域中急需解决的关键技术问题进行基础研究，以便乳酸菌更好地服务于人类。
　　1、乳酸菌食品级载体的构建：自80年代建立乳酸菌分子生物学以来，已构建了很多有工业应用价值的重组乳酸菌，但是这类工程菌株一直没能投入生产，其主要原因在于这种重组菌经过了遗传修饰，存在安全隐患如携带抗生素抗性标记等。目前课题组通过筛选食品级选择标记、理性设计高效启动子、信号肽等结构元件，建立细胞外和细胞表面靶向分泌的食品级系统，旨在保证重组菌在工业发酵、食品加工以及穿过肠道等环节的安全，尽早实现重组菌的潜在应用价值。
　　2、功能蛋白的定向表达：乳酸菌是肠道正常有益菌群，以乳酸菌为载体将治疗性蛋白或抗原传递至肠道粘膜表面，继而诱导粘膜免疫和系统免疫成为乳酸菌新功能开发的一个重要方向，但是目前乳酸菌表达的抗原多以分泌或胞内形式产生，致使免疫强度低，这是乳酸菌活载体疫苗存在的主要问题。课题组利用细胞壁锚定结构域，将其连接与外源蛋白的C-端，构建了细胞表面靶向表达载体，使表达的外源蛋白在分泌过程中穿过细胞膜以共价键结合到细胞壁的肽聚糖上，实现了抗原蛋白、乳糖酶等功能蛋白在乳酸菌细胞表面的靶向表达；同时，课题组还以绿色荧光蛋白为报告基因，借助于细胞壁蛋白桥，在体外建立了乳酸菌表面展示系统，为乳酸菌作为载体疫苗的应用奠定了基础。
　　3、益生菌遗传操作载体的构建与功能开发：传统的益生菌主要包括乳杆菌、双歧杆菌等乳酸菌种类, 被广泛用于酸奶、干酪、发酵肉制品等产品中,目前益生菌的分子操作工具还很不完善。课题组对分离自干酪乳杆菌中一隐蔽性质粒进行改造，获得宽宿主的乳杆菌表达载体，将功能性蛋白如过氧化氢酶、乙醛脱氢酶、脂肪酸脱氢酶等导入酸奶发酵剂中，以提高发酵剂的抗氧化性、风味和营养价值。目前还对乳酸菌的代谢工程进行了初步研究。
　　4、乳酸菌及其活性物质：筛选到一批性能优良的乳酸菌菌株、研制出具有应用潜能的微生态制剂、青贮剂、益生菌剂等。重点对乳球菌产生的乳链菌素及其它抗菌肽的制备和应用进行了研究。
　　5、乳酸菌噬菌体的生态分布及其抗性噬菌体菌株的构建：对发酵乳制品过程中存在污染发酵剂的噬菌体进行生态调查和分离，并构建抗噬菌体工业发酵菌株。
　　
　　承担课题
　　近五年承担的部分科研课题：
　　1． 乳酸菌食品级安全载体构建的技术，国家863课题，批准号：2006AA10Z321(2006-2010)，50万元.
　　2．高活性乳酸菌发酵剂制造的关键技术。国家863课题，批准号：2006AA10Z344(2006-2009)，40万元.
　　3．益生菌定向筛选与功能开发关键技术。国家863课题，批准号：2008AA10Z335(2007-2010)，30万元.
　　4．猪圆环病毒活疫苗载体的构建及免疫分析，国家自然科学基金，批准号30570043(2006.1~2008.12)，26万元.
　　5．绿色巴夫藻脂肪酸去饱和酶基因的克隆及表达，国家自然科学基金，批准号30370035(2004.1~2006.12)，20万元.
　　6．纤维素酶和木聚糖酶基因在乳酸菌中的表达，教育部留学回国基金，2002.1~2004.12.
　　
　　研究成果及发表论文
　　科研成果：
　　近五年，在国际SCI期刊发表文章5余篇，国内核心期刊10余篇。申请发明专利2项。
　　代表性学术论文 (* 通讯作者Corresponding author):
　　1.Wang K, Kong J* et al., Expression of the capsid protein of Porcine Circovirus Type 2 in Lactococcus lactis for oral vaccination. Journal of Virological Methods. 2008, 150：1-6.
　　2.Niu Y, Kong J*, Longyun Fu. Identification of a novel C20-elongase gene from the marine algae Pavlova viridis and its overexpression in Escherichia coli. Marine Biotechnology, 2008, (Accepted).
　　3.Niu Y, Kong J*, Xu Y. A novel GFP-fused eukarytic membrane protein expression system in　Lactococcus lactis and its application to overexpression of an elongase. Current Microbiology,2008,(Accepted)
　　4.Shaohua Wang, Jian Kong* and Xiuhong Zhang. Identification and characterization of the two-component cell lysis cassette encoded by temperate bacteriophage φPYB5 of Lactobacillus fermentum. Journal of Applied Microbiology, 2008, (Accepted)
　　5.Zhang XH, Kong J*, Qu Y. Isolation and characterization of a Lactobacillus fermentum temperate bacteriophage from Chinese yogurt. Journal of Applied Microbiology, 2006, 101：857–863.
　　6.Kong Jian,Jytte Josephsen. The role of the plasmid-encoded R/M system LlaBIII in protecting Lactococcus lactis against bacteriophages. Letter in Applied Microbiology, 2002,34,249-253.
　　7.孔健, Jytte Josephsen, 马桂荣.限制和修饰系统LlaBIII在构建抗噬菌体菌株中的作用. 微生物学报,2002, 42(2)：246-249.
　　8.孔健, Jytte Josephsen,马桂荣. 限制和修饰酶基因LlaBIII的克隆及分析. 生物工程学报,2001, 17(6)：663-668.
　　9.孔健，庄绪亮，马桂荣. 固定化乳酸乳球菌连续生产Nisin的研究. 微生物学报,2001, 41(5)：731-735.
　　10.孔健，顾笑梅, 马桂荣. 乳酸乳球菌乳脂亚种W56中质粒pJW566生物学特性研究. 微生物学报, 41(6)：542-547.
　　11.孔健，郑宝灿，马桂荣. SL益生素对实验性高血脂症的防治效果. 山东大学学报,1998, 33(1)：106-109.
　　12.顾笑梅，孔健，马桂荣等. 乳酸菌Z_(222)产胞外多糖(EPSⅠ)对免疫细胞功能的影响. 中华微生物学和免疫学杂志,2003, 23(6)：442-445.
　　13.顾笑梅，孔健，王富生等. 一株乳酸菌所产胞外多糖对荷瘤小鼠机体免疫功能的影响。 微生物学宝，2003， 43（2）：251-256.
　　14.荆谷，孔健，孙磊等. 乳酸乳球菌L9产类细菌素lactococcin GJ-9发酵条件的研究,食品与发酵工业,2003,(3):15-18.
　　15.王富生，任红卫，孔健. 乳酸菌青贮剂在秸秆黄贮中的作用.山东大学学报, 2004, 39（2）：112-115.
　　16.王稚萱; 孔健．Lactobacillus brevis W5-17产生1,3-丙二醇的条件研究．食品与发酵工业,2007,4:6-9.
　　
　　著作
　　1. 孔健主编，《农业微生物技术》， 化工出版社，北京，2005。
　　2. 郭兴华主编, 《益生乳酸细菌——分子生物学及生物技术》，孔健参编第二章“乳酸细菌的基因工程”，25-55页，科学出版社，北京，2008。
　　3. 沈萍主编，《微生物学》（第2版），孔健参编第五章“微生物的代谢”，101-131页，北京，高等教育出版社，2006.
　　4. 汪天虹主编，《微生物分子育种原理和技术》，参编部分节次，化工出版社，北京，2004。
　　
　　专利
　　1、绿色巴夫藻多不饱和脂肪酸延伸酶的核苷酸序列及其应用，发明专利，申请号或公开号200710015216.5
　　2、一种快速克隆和鉴定细菌β-半乳糖苷酶基因的方法，发明专利，申请号或公开号200710014994.2

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